Title: | OPTIMIRANJE IN KINETIČNE ŠTUDIJE ENCIMSKO KATALIZIRANE HIDROLIZE LAKTOZE |
---|
Authors: | ID Čokl, Gregor (Author) ID Goršek, Andreja (Mentor) More about this mentor... ID Pečar, Darja (Comentor) |
Files: | MAG_Cokl_Gregor_2014.pdf (1,79 MB) MD5: 03B91BD15760BE40B73E8AC8F1847640
|
---|
Language: | Slovenian |
---|
Work type: | Master's thesis/paper |
---|
Typology: | 2.09 - Master's Thesis |
---|
Organization: | FKKT - Faculty of Chemistry and Chemical Engineering
|
---|
Abstract: | Namen magistrskega dela je bila raziskava procesa imobilizacije encima galaktozidaze na
trdi nosilec, ki je bil v našem primeru silikagel. Študija je bila usmerjena predvsem na
presnovo mlečnega sladkorja-laktoze ter vzporedno še na kvantitativno analizo vsebnosti
prostih encimov v raztopini, s čimer se je določala stopnja imobilizacije encima.
Delo je potekalo v dveh fazah, od katerih je bila prva proces imobilizacije encima in druga
reakcija tako pripravljenega nosilca z laktozno puferno raztopino. Pred samim procesom
imobilizacije je bilo potrebno pripraviti ustrezni pufer. Izbrali smo fosfatni pufer
(K2HPO4/KH2PO4) z različnimi koncentracijami in pH, ki smo mu dodali določeno količino
laktoze.
Med procesom imobilizacije je bilo najprej pomembno čiščenje silikagela ter šele nato
nanos APTES-a, glutaraldehida in encima.
Reakcija je potekala v čaši (šaržni proces) pri konstantni temperaturi (40 oC) v dveh
zaporednih serijah po 2 uri. Vzorce smo odvzemali na vsakih 15 minut, ki smo jih kuhali,
da smo denaturirali encim. Vzorce za določitev prostih proteinov smo jemali le na koncu
vsake serije.
Po reakciji je sledila analiza vzorcev s spektometrom. Določili smo absorbanco, iz katere
smo s pomočjo predhodno narejene umeritvene krivulje, tako za proteinske kot glukozne
teste, izračunali ustrezne koncentracije.
Iz rezultatov je razvidno, da je maksimalna presnova pri pH = 7,0, kar je v skladu z
objavljenimi študijami. Proteinski testi pa so pokazali nižjo vsebnost encima v raztopini pri
nižjem pH, kar se prav tako sklada z literaturnimi podatki. |
---|
Keywords: | hidroliza, silikagel, laktoza, beta-galaktozidaza |
---|
Place of publishing: | Maribor |
---|
Publisher: | [G. Čokl] |
---|
Year of publishing: | 2014 |
---|
PID: | 20.500.12556/DKUM-46788 |
---|
UDC: | 66.094.941:661.183.7:637.345(043.2) |
---|
COBISS.SI-ID: | 18402582 |
---|
NUK URN: | URN:SI:UM:DK:DSX5CXXN |
---|
Publication date in DKUM: | 03.12.2014 |
---|
Views: | 1805 |
---|
Downloads: | 227 |
---|
Metadata: | |
---|
Categories: | KTFMB - FKKT
|
---|
:
|
Copy citation |
---|
| | | Average score: | (0 votes) |
---|
Your score: | Voting is allowed only for logged in users. |
---|
Share: | |
---|
Hover the mouse pointer over a document title to show the abstract or click
on the title to get all document metadata. |