| | SLO | ENG | Piškotki in zasebnost

Večja pisava | Manjša pisava

Iskanje po katalogu digitalne knjižnice Pomoč

Iskalni niz: išči po
išči po
išči po
išči po
* po starem in bolonjskem študiju

Opcije:
  Ponastavi


1 - 10 / 25
Na začetekNa prejšnjo stran123Na naslednjo stranNa konec
1.
Vpliv presnovno pomembnih dejavnikov na funkcijo celic beta
Andraž Stožer, 2013, doktorska disertacija

Opis: V endokrinih celicah Langerhansovih otočkov so kalcijevi ioni (Ca2+) pomemben element sklopitve med celično stimulacijo in sekrecijo hormonov. Od uvedbe sodobne fluorimetrije so številne študije in vitro, pretežno na izoliranih otočkih, preučevale učinke različnih sekretagogov na znotrajcelično koncentracijo ionov Ca2+, predvsem v celicah beta, ki izločajo inzulin. Pri razumevanju fizioloških sprememb znotrajcelične koncentracije ionov Ca2+ ostaja vrsta nejasnosti. Zaradi tehničnih omejitev izsledki teh študij temeljijo na podatkih, pridobljenih na razmeroma majhnem številu v najbolj zunanjih plasteh otočka nahajajočih se celic. Prav tako so rezultati odvisni od trajanja in pogojev kultivacije izoliranih otočkov, zaradi česar niso zmeraj združljivi z rezultati, pridobljenimi v pogojih in vivo. Poglavitni nejasnosti sta, kakšna je narava oscilacij znotrajcelične koncentracije ionov Ca2+ in ali so kalcijevi valovi tisti, ki sinhronizirajo aktivnost velikega števila celic. V tej disertaciji predstavljamo novo eksperimentalno metodo in situ, ki združuje pripravo sveže tkivne rezine trebušne slinavke miši z barvanjem z estrskimi fluorescenčni indikatorji, občutljivimi na znotrajcelično koncentracijo ionov Ca2+, in s konfokalno mikroskopijo z laserskim skenerjem. Metodo smo razvili, da bi v eksperimentalnih pogojih, ki so zelo blizu razmeram in vivo, preučevali veliko število celic iz vseh plasti Langerhansovih otočkov in z njeno pomočjo odgovorili na zgornji vprašanji. Da bi dobili boljši vpogled v aktivnost in sklopitev celic, smo v pričujoči nalogi kot prvi analizirali delovanje Langerhansovih otočkov s pomočjo teorije kompleksnih mrež. V realni prostor umeščene mreže smo konstruirali iz električno sklopljenih celic beta, ki smo jih funkcionalno povezali na osnovi korelacij med fluorescenčnimi signali vseh parov celic. Funkcionalne mreže smo analizirali v luči znanih strukturnih in fizioloških značilnosti otočkov. Naši poskusi so pokazali, da so v svežih tkivnih rezinah stabilne hitre oscilacije koncentracije znotrajceličnih ionov Ca2+ prevadujoči tip oscilacij in da so kalcijevi valovi podlaga sinhronizacije teh oscilacij v različnih celicah določenega otočka. Prav tako smo ugotovili, da na začetku odziva na glukozo tudi velika sprememba znotrajcelične koncentracije Ca2+ v določeni celici ni zadosten pogoj za odziv ostalih celic in da je za sklopitev med celicami nujna presnovna aktivacija vsake celice. Ob preučevanju razvoja mreže celic beta po odzivu na glukozo smo pokazali, da so celice bolj korelirane v stimulativnih kot v nestimulativnih pogojih. Največjo stopnjo korelacije, v pretežni meri neodvisno od evklidskih razdalj med celicami, smo ugotovili v času aktivacije in deaktivacije, ko se vse celice odzivajo na zunanji stimulus. V času stacionarne aktivnosti stopnja korelacije kaže jasno odvisnost od evklidske razdalje in potrjuje idejo, da se celice beta sinhronizirajo s pomočjo kalcijevih valov, ki se širijo od celice do celice. Funkcionalna mreža celic beta kaže lastnosti malega sveta, kar namiguje, da je sincicij celic beta organiziran tako, da podpira optimalno sinhronizacijo. Naša metoda je omogočila vpogled v delovanje večjega števila celic naenkrat kot doslej razpoložljive metode, odpravila kontroverze glede tipa oscilacij in prisotnosti kalcijevih valov in osvetlila razmerje med topologijo mreže in njenim delovanjem. Menimo, da so to zadostni razlogi, da postane ena od metod izbora za študij fiziologije Langerhansovih otočkov.
Ključne besede: celica beta, sinhronizacija, teorija grafov, kompleksna mreža, znotrajcelični kalcij, oscilacije
Objavljeno: 12.03.2013; Ogledov: 2101; Prenosov: 411
.pdf Celotno besedilo (8,17 MB)

2.
Glucose-stimulated calcium dynamics in Islets of Langerhans in acute mouse pancreas tissue slices
Andraž Stožer, Jurij Dolenšek, Marjan Rupnik, 2013, izvirni znanstveni članek

Opis: In endocrine cells within islets of Langerhans calcium ions couple cell stimulation to hormone secretion. Since the advent of modern fluorimetry, numerous in vitro studies employing primarily isolated mouse islets have investigated the effects of various secretagogues on cytoplasmic calcium, predominantly in insulin-secreting beta cells. Due to technical limitations, insights of these studies are inherently limited to a rather small subpopulation of outermost cells. The results also seem to depend on various factors, like culture conditions and duration, and are not always easily reconcilable with findings in vivo. The main controversies regard the types ofcalcium oscillations, presence of calcium waves, and the level of synchronized activity. Here, we set out to combine the in situ acute mouse pancreas tissue slice preparation with noninvasive fluorescent calcium labeling and subsequent confocal laser scanning microscopy to shed new light on the existing controversies utilizing an innovative approach enabling the characterization of responses in many cells from all layers of islets. Our experiments reproducibly showed stable fast calcium oscillations on a sustained plateau rather than slow oscillations as the predominant type of response in acute tissue slices, and that calcium waves are the mechanistic substrate for synchronization of oscillations. We also found indirect evidencethat even a large amplitude calcium signal was not sufficient and thatmetabolic activation was necessary to ensure cell synchronization upon stimulation with glucose. Our novel method helped resolve existing controversies and showed the potential to help answer important physiological questions, making it one of the methods of choice for the foreseeable future.
Ključne besede: glucose, pancreas, islets of Langerhans, mice
Objavljeno: 10.07.2015; Ogledov: 526; Prenosov: 205
.pdf Celotno besedilo (2,83 MB)
Gradivo ima več datotek! Več...

3.
Cell physiology in tissue slices
Andraž Stožer, Jurij Dolenšek, Maša Skelin, Marjan Rupnik, 2013, pregledni znanstveni članek

Opis: Uporaba izoliranih endokrinih celic je omogočila razvoj številnih metod za oceno osnovne celične arhitekture in opredelitev pomembnega dela molekularnih mehanizmov, ki sodelujejo pri celičnih procesih, kot sta vzdražnost celic in izločanje hormonov v procesu eksocitoze po porastu znotrajcelične koncentracije kalcijevih ionov. Ta prizadevanja so vodila v oblikovanje dogovornih modelov, ki razlagajo aktivacijo in splošen način delovanja določenega celičnega tipa. Z uporabo svežih tkivnih rezin lahko presežemo dosedanje raziskave in razkrijemo celo vrsto porajajočih se lastnosti, ki jih dogovorni modeli ne morejo zlahka predvideti niti razložiti. V tem članku predstavljamo izbor naših najpomembnejših eksperimentalnih ugotovitev na celicah beta v tkivnih rezinah trebušne slinavke.
Ključne besede: celica beta, Langerhansov otoček, tkivna rezina trebušne slinavke miši, elektrofiziologija, konfokalna fluorescenčna mikroskopija, kalcijevo barvilo, teorija grafov
Objavljeno: 10.07.2015; Ogledov: 587; Prenosov: 33
URL Povezava na celotno besedilo

4.
Akutna respiracijska acidoza in alkaloza
Andraž Stožer, Marjan Rupnik, 2014, pregledni znanstveni članek

Opis: Izhodišče: Obstajajo trije različni pristopi k oceni kislinsko-baznega stanja bolnika: bostonski, kopenhagenski in Stewartov, ki temeljijo na različnih izmerjenih parametrih. Poleg vnetih debat o tem, kateri od pristopov je boljši, vnaša med študente, raziskovalce in klinike zmedo dejstvo, da med svojim študijem tipično osvojijo le enega od omenjenih pristopov in zato ne morejo v celoti razumeti virov, ki uporabljajo katerega od drugih pristopov, poleg tega pa ne morejo kritično oceniti prednosti in omejitev določenega pristopa. Avtorja v članku predstaviva in opredeliva osnovne parametre, značilne za posamezne pristope, in poudariva razlike in podobnosti med njimi. Posebno pozornost namenjava vprašanju, kako posamezni pristopi ocenjujejo spremembo v koncentraciji plazemskega bikarbonata, do katere pride med primarnimi respiracijskimi spremembami in katerih ustrezno razumevanje je potrebno za pravilno interpretiranje kroničnih respiracijskih in metaboličnih kislinsko-baznih sprememb. Zaključek: Med akutno respiracijsko acidozo se koncentracija bikarbonata zviša in med akutno respiracijsko alkalozo zniža v odvisnosti od moči nebikarbonatnih pufrov. Med akutnimi respiracijskimi motnjami se koncentracija pufrske baze (uporablja jo kopenhagenski pristop), navidezna razlika močnih ionov, efektivna razlika močnih ionov in vrzel močnih ionov (uporablja jih Stewartov pristop) ne spremenijo, anionska vrzel (uporabljata jo bostonski in kopenhagenski pristop) pa se med akutno respiracijsko acidozo zmanjša, med akutno respiracijsko alkalozo pa zveča.
Ključne besede: respiratorne motnje, Davenportov diagram, Gamblov diagram, kislinsko-bazna motnja
Objavljeno: 30.12.2015; Ogledov: 930; Prenosov: 63
.pdf Celotno besedilo (780,41 KB)
Gradivo ima več datotek! Več...

5.
Fiziologija prebavne cevi
Andraž Stožer, Jurij Dolenšek, Marjan Rupnik, 2010, pregledni znanstveni članek

Ključne besede: fiziologija, prebava, prebavila, prebavna cev
Objavljeno: 30.12.2015; Ogledov: 587; Prenosov: 35
URL Povezava na celotno besedilo

6.
Fiziologija prebavne cevi
Andraž Stožer, Jurij Dolenšek, Marjan Rupnik, 2010, pregledni znanstveni članek

Ključne besede: Bolezni prebavil, fiziologija, prebava, prebavila, prebavna cev, Prebavne cevi, Prehrana
Objavljeno: 30.12.2015; Ogledov: 741; Prenosov: 57
URL Povezava na celotno besedilo

7.
Progressive glucose stimulation of islet beta cells reveals a transition from segregated to integrated modular functional connectivity patterns
Rene Markovič, Andraž Stožer, Marko Gosak, Jurij Dolenšek, Marko Marhl, Marjan Rupnik, 2015, izvirni znanstveni članek

Opis: Collective beta cell activity in islets of Langerhans is critical for the supply of insulin within an organism. Even though individual beta cells are intrinsically heterogeneous, the presence of intercellular coupling mechanisms ensures coordinated activity and a well-regulated exocytosis of insulin. In order to get a detailed insight into the functional organization of the syncytium, we applied advanced analytical tools from the realm of complex network theory to uncover the functional connectivity pattern among cells composing the intact islet. The procedure is based on the determination of correlations between long temporal traces obtained from confocal functional multicellular calcium imaging of beta cells stimulated in a stepwise manner with a range of physiological glucose concentrations. Our results revealed that the extracted connectivity networks are sparse for low glucose concentrations, whereas for higher stimulatory levels they become more densely connected. Most importantly, for all ranges of glucose concentration beta cells within the islets form locally clustered functional sub-compartments, thereby indicating that their collective activity profiles exhibit a modular nature. Moreover, we show that the observed non-linear functional relationship between different network metrics and glucose concentration represents a well-balanced setup that parallels physiological insulin release.
Ključne besede: endocrinology, computational biophysics, calcium signalling, biological physics
Objavljeno: 23.06.2017; Ogledov: 442; Prenosov: 163
.pdf Celotno besedilo (957,14 KB)
Gradivo ima več datotek! Več...

8.
Functional connectivity in islets of Langerhans from mouse pancreas tissue slices
Andraž Stožer, Marko Gosak, Jurij Dolenšek, Matjaž Perc, Marko Marhl, Marjan Rupnik, Dean Korošak, 2013, izvirni znanstveni članek

Opis: We propose a network representation of electrically coupled beta cells in islets of Langerhans. Beta cells are functionally connected on the basis of correlations between calcium dynamics of individual cells, obtained by means of confocal laser-scanning calcium imaging in islets from acute mouse pancreastissue slices. Obtained functional networks are analyzed in the light of known structural and physiological properties of islets. Focusing on the temporal evolution of the network under stimulation with glucose, we show thatthe dynamics are more correlated under stimulation than under non-stimulated conditions and that the highest overall correlation, largely independent of Euclidean distances between cells, is observed in the activation and deactivation phases when cells are driven by the external stimulus. Moreover, we find that the range of interactions in networks during activity shows a clear dependence on the Euclidean distance, lending support to previous observations that beta cells are synchronized via calcium waves spreading throughout islets. Most interestingly, the functional connectivity patterns between beta cells exhibit small-world properties, suggesting that beta cells do not form a homogeneous geometric network but are connected in a functionally more efficient way. Presented results provide support for the existing knowledge of beta cell physiology from a network perspective and shedimportant new light on the functional organization of beta cell syncitia whose structural topology is probably not as trivial as believed so far.
Ključne besede: islets of Langerhans, mouse pancreas
Objavljeno: 16.06.2017; Ogledov: 572; Prenosov: 208
.pdf Celotno besedilo (798,57 KB)
Gradivo ima več datotek! Več...

9.
The relationship between membrane potential and calcium dynamics in glucose-stimulated beta cell syncytium in acute mouse pancreas tissue slices
Jurij Dolenšek, Andraž Stožer, Maša Skelin, Evan Miller, Marjan Rupnik, 2013, izvirni znanstveni članek

Opis: Oscillatory electrical activity is regarded as a hallmark of the pancreatic beta cell glucose-dependent excitability pattern. Electrophysiologically recorded membrane potential oscillations in beta cells are associated with in-phase oscillatory cytosolic calcium activity ([Ca2+]i) measured with fluorescent probes. Recent high spatial and temporal resolution confocal imaging revealed that glucose stimulation of beta cells in intact islets within acute tissue slices produces a [Ca2+]i change with initial transient phase followed by a plateau phase with highly synchronized [Ca2+]i oscillations. Here, we aimed to correlate the plateau [Ca2+]i oscillations with the oscillations of membrane potential using patch-clamp and for the first time high resolution voltage-sensitive dye based confocal imaging. Our results demonstrated that the glucose-evoked membrane potential oscillations spread over the islet in a wave-like manner, their durations and wave velocities being comparable to the ones for [Ca2+]i oscillations and waves. High temporal resolution simultaneous records of membrane potential and [Ca2+]i confirmed tight but nevertheless limited coupling of the two processes, with membrane depolarization preceding the [Ca2+]i increase. The potassium channel blocker tetraethylammonium increased the velocity at which oscillations advanced over the islet by several-fold while, at the same time, emphasized differences in kinetics of the membrane potential and the [Ca2+]i. The combination of both imaging techniques provides a powerful tool that will help us attain deeper knowledge of the beta cell network.
Ključne besede: glucose, pancreas, mice
Objavljeno: 19.06.2017; Ogledov: 408; Prenosov: 178
.pdf Celotno besedilo (2,57 MB)
Gradivo ima več datotek! Več...

10.
Optimization of induction of mild therapeutic hypothermia with cold saline infusion
Jure Fluher, Andrej Markota, Andraž Stožer, Andreja Sinkovič, 2015, izvirni znanstveni članek

Opis: Cold fluid infusions can be used to induce mild therapeutic hypothermia after cardiac arrest. Fluid temperature higher than 4°C can increase the volume of fluid needed, prolong the induction phase of hypothermia and thus contribute to complications. We performed a laboratory experiment with two objectives. The first objective was to analyze the effect of wrapping fluid bags in ice packs on the increase of fluid temperature with time in bags exposed to ambient conditions. The second objective was to quantify the effect of insulating venous tubing and adjusting flow rate on fluid temperature increase from bag to the level of an intravenous cannula during a simulated infusion. The temperature of fluid in bags wrapped in ice packs was significantly lower compared to controls at all time points during the 120 minutes observation. The temperature increase from the bag to the level of intravenous cannula was significantly lower for insulated tubing at all infusion rates (median temperature differences between bag and intravenous cannula were: 8.9, 4.8, 4.0, and 3.1°C, for non-insulated and 5.9, 3.05, 1.1, and 0.3°C, for insulated tubing, at infusion rates 10, 30, 60, and 100 mL/minute, respectively). The results from this study could potentially be used to decrease the volume of fluid infused when inducing mild hypothermia with an infusion of cold fluids.
Ključne besede: cardiac arrest, intravenous infusion, therapeutic hypothermia
Objavljeno: 03.08.2017; Ogledov: 276; Prenosov: 49
.pdf Celotno besedilo (232,18 KB)
Gradivo ima več datotek! Več...

Iskanje izvedeno v 0.16 sek.
Na vrh
Logotipi partnerjev Univerza v Mariboru Univerza v Ljubljani Univerza na Primorskem Univerza v Novi Gorici