1. Use of non-conventional cell disruption method for extraction of proteins from black yeastsMaja Čolnik, Mateja Primožič, Željko Knez, Maja Leitgeb, 2016, izvirni znanstveni članek Opis: The influence of pressure and treatment time on cells disruption of different black yeasts and on activities of extracted proteins using supercritical carbon dioxide process was studied. The cells of three different black yeasts Phaeotheca triangularis, Trimatostroma salinum, and Wallemia ichthyophaga were exposed to supercritical carbon dioxide (SC $CO_2$) by varying pressure at fixed temperature (35°C). The black yeasts cell walls were disrupted, and the content of the cells was spilled into the liquid medium. The impact of SC $CO_2$ conditions on secretion of enzymes and proteins from black yeast cells suspension was studied. The residual activity of the enzymes cellulase, $beta$-glucosidase, $alpha$-amylase, and protease was studied by enzymatic assay. The viability of black yeast cells was determined by measuring the optical density of the cell suspension at 600 nm. The total protein concentration in the suspension was determined on UV–Vis spectrophotometer at 595 nm. The release of intracellular and extracellular products from black yeast cells was achieved. Also, the observation by an environmental scanning electron microscopy shows major morphological changes with SC $CO_2$-treated cells. The advantages of the proposed method are in a simple use, which is also possible for heat-sensitive materials on one hand and on the other hand integration of the extraction of enzymes and their use in biocatalytical reactions.
Ključne besede: P. triangularis, W. ichtyophaga, T. salinum, supercritical carbon dioxide, enzyme activity, cells
Objavljeno v DKUM: 10.07.2017; Ogledov: 1546; Prenosov: 401
 Celotno besedilo (2,13 MB)
Gradivo ima več datotek! Več... |
2. Vpliv SC CO 2 na odpiranje celic črne kvasovke Phaeotheca triangularisKaja Kajzer, 2016, magistrsko delo Opis: V magistrskem delu smo proučevali vpliv tlaka in časa inkubacije celične suspenzije črne kvasovke Phaeotheca triangularis v superkritičnem ogljikovem dioksidu. Celično suspenzijo smo inkubirali pri temperaturi 35 °C in pri različnih tlakih in časih inkubacije v SC CO2 in sicer pri 100 bar, 200 bar in 300 bar, ter časih izpostavitve 0,5 ure, 1 uro, 2 uri in 3 ure. Zanimalo nas je kako tlak in čas izpostavitve celične suspenzije P. triangularis v SC CO2 vplivata na aktivnost nekaterih encimov: α-amilaze, β-glukozidaze, celulaze in proteaze, na razmerje med nukleinskimi kislinami in proteini ter koncentracijo proteinov. Z razmazi celične suspenzije pred in po inkubaciji v SC CO2 na gojišča pa smo določevali še preživelost celične kulture P. triangularis. Ugotovili smo, da z naraščanjem tlaka in časa inkubacije celične suspenzije v SC CO2, preživelost celic P. triangularis upada. Tudi preostala aktivnost encimov se je spreminjala. Preostali aktivnosti celulaze in α-amilaze z naraščanjem časa izpostavitve celične suspenzije SC CO2 naraščata, medtem ko preostali aktivnosti β-glukozidaze in proteaze upadata. Preostale aktivnosti vseh preučevanih encimov z naraščanjem tlaka izpostavitve upadajo. Koncentracija proteinov v celični suspenziji P. triangularis z naraščanjem časa in tlaka narašča. Z določevanjem razmerja med nukleinskimi kislinami in proteini pa smo ugotovili, da so v celični suspenziji prisotni še proteini, fenoli ali druge snovi.
Ključne besede: črne kvasovke, Phaeotheca triangularis, superkritični ogljikov dioksid, aktivnostni test, encimi
Objavljeno v DKUM: 01.04.2016; Ogledov: 15685; Prenosov: 159
Celotno besedilo (2,82 MB) |
3. AKTIVNOST ENCIMOV IZ ČRNE KVASOVKE PHAEOTHECA TRIANGULARISLaura Kolednik, 2014, diplomsko delo Opis: Prevladujoča skupina gliv v solinah Jadranskega morja so črne kvasovke. Ena izmed njih je Phaeotheca triangularis, ki smo jo v tem diplomskem delu obravnavali. P. triangularis je halofilna kvasovka, ki v solinah najbolje uspeva pri slanosti od 22 do 28 %. Celice P. triangularis smo mehansko razbijali s homogenizatorjem od 10 do 90 min pri atm. tlaku in temperaturi 35 °C. Za primerjavo smo celično suspenzijo P. triangularis inkubirali pri atm. tlaku in temperaturi 35 °C. S homogenizatorjem so se celične stene kvasovk razbile in njihova vsebina se je izlila v tekoč medij. Tako smo lahko preučevali vpliv homogeniziranja na izločanje encimov in proteinov iz celične suspenzije P. triangularis v odvisnosti od časa izpostavitve. Določevali smo preostalo aktivnost encimov celulaze, β-glukozidaze, α-amilaze in proteaze tako, da smo na UV-Vis spektrofotometru merili absorbance supernatantov pri različnih valovnih dolžinah. Zanimal nas je vpliv mehanskih sil na preživelost celic P. triangularis v celični suspenziji. Ugotovili smo, da je preživelost celic P. triangularis s podaljševanjem časa homogenizacije upadala, medtem ko je koncentracija proteinov v celični suspenziji P. triangularis naraščala.
Ključne besede: P. triangularis, homogeniziranje, celulaza, β-glukozidaza, α-amilaza, proteaza
Objavljeno v DKUM: 22.09.2014; Ogledov: 2769; Prenosov: 288
Celotno besedilo (2,07 MB) |
