1. DOLOČEVANJE SESTAVE MAŠČOBNIH KISLIN V JOGURTUMojca Lunder, 2015, diplomsko delo Opis: Namen diplomskega dela je določevanje sestave maščobnih kislin v jogurtu. Analizirali smo 13 navadnih in 7 probiotičnih jogurtov z različno vsebnostjo maščobe od 0,1 % do 3,8 % podano na deklaraciji. Maščobne kisline smo določili s plinsko kromatografijo kot metilne estre po alkalno katalizirani metanolizi gliceridov po predhodni ekstrakciji maščobe. Določili smo 17 maščobnih kislin, od tega jih je le 13 prisotnih v vsebnosti 1 % (m/m) ali več. Približno 28 % (m/m) maščobnih kislin v jogurtih je mononenasičenih, okoli 2,3 % (m/m) pa je polinenasičenih z najpomembnejšo linolno kislino (C18:2) v vrednosti 1,8 % (m/m). Nasičenih maščobnih kislin je skoraj 66 % (m/m). Metodo smo validirali. Rezultati kažejo, da je ta metoda uporabna in ponovljiva za določevanje maščobnih kislin . Ekstrakcija maščobe iz jogurtov daje od 84 % do 98 % izkoristke.
Ključne besede: maščobne kisline, jogurti, ekstrakcija, plinska kromatorafija, plamensko ionizacijski detektor, validacija analizne metode.
Objavljeno v DKUM: 11.12.2015; Ogledov: 2384; Prenosov: 173
 Celotno besedilo (2,19 MB) |
2. Multivariate data analysis of erythrocyte membrane phospholipid fatty acid profiles in the discrimination between normal blood tissue and various disease statesZdenka Cencič-Kodba, Darinka Brodnjak-Vončina, Marjana Novič, Uroš Potočnik, 2010, izvirni znanstveni članek Opis: The investigation presented here aims to compare the fatty acid composition of red blood cells of patients with different disease states and to test the hypothesis that the changes in fatty acid profiles derived from erythrocyte phospholipids might be relevant to various diseases. The study sample consisted of 342 blood donors, among them 135 with inflammatory bowel disease, 53 with uterine leiomyoma, 14 with verified absence of uterine leiomyoma, 52 with asthma, 18 with colon adenomas, and 70 blood samples without any of mentioned diseases that was used as a control group. After the isolation of erythrocytes from blood samples, total extracted lipids were separated by solid-phase extraction (SPE) into non polar lipids and polar phospholipids. After the saponification of phospholipid fraction, the esterification process followed with boron trifluoride-methanol reagent. The fatty acid methyl ester (FAME) composition of the total red blood cell phospholipid fraction was analyzed by gas chromatography (GC) with flame ionization detector (FID). Additionally two fatty aldehyde dimethyl acetals (hexadecanal and octadecanal dimethyl acetals; 16:0 DMA and 18:0 DMA) derived from erythrocyte membrane plasmalogen phospholipids were also determined. The resulting fatty acid and plasmalogen linked fatty acid composition was evaluated by the principal component analysis (PCA). We demonstrated decreased levels of omega-3 polyunsaturated fatty acids (n-3 PUFAs) in red blood cell membrane of patients with colon adenomas. Also, a large negative correlation was observed among all samples between the quantity of saturated acids and arachidonic (20:4n6) acid as well as saturated acids and adrenic (22:4n6) acid. In PCA score plot a group of female donors is distinguished mainly by the content of linoleic (18:2n6) acid; a small subgroup shows its concentration highly above the average value. At the same time, the same subgroup has both dimethyl acetals below the average concentrations. The study demonstrates feasibility of multivariate data analysis in discrimination of patients with different diseases according to fatty acid profile and suggests considerable differences in membrane fatty acid profiles in patients with various disease states.
Ključne besede: erythrocyte phospholipids, cell membrane, fatty acid profiles, differentiation, disease state, gas chromatography, principal component analysis
Objavljeno v DKUM: 31.05.2012; Ogledov: 3112; Prenosov: 96
Celotno besedilo (280,87 KB)
Gradivo ima več datotek! Več... |
3. DOLOČEVANJE SESTAVE MAŠČOBNIH KISLIN IN NJIHOVIH PROFILOV V MEMBRANAH RDEČIH KRVNIH CELIC BOLNIKOV Z RAZLIČNIMI BOLEZNIMI Z METODO PLINSKE KROMATOGRAFIJEZdenka Cencič Kodba, 2011, doktorska disertacija Opis: V doktorski disertaciji sem primerjala sestave maščobnih kislin in njihove karakteristične profile izoliranih fosfolipidov membran rdečih krvnih celic bolnikov z različnimi boleznimi z namenom, da bi preverila hipotezo, da so razlike med profili maščobnih kislin pomembne pri prepoznavanju različnih bolezenskih stanj oziroma motenj v metabolizmu.
V študijo sem vključila vzorce krvi 272 bolnikov, od tega 135 bolnikov s kronično vnetno črevesno boleznijo (60 bolnikov s Crohnovo črevesno boleznijo in 75 bolnikov z drugimi vnetnimi črevesnimi boleznimi), 18 bolnikov s črevesnimi polipi, 52 bolnikov z astmo, 53 bolnic z miomi na maternici ter 14 vzorcev krvi žensk, ki miomov nimajo. 70 zdravih ljudi, ki niso oboleli za nobeno od naštetih bolezni, je predstavljalo kontrolno skupino. Izbira bolnikov je bila naključna in neodvisna od njihovih prehranjevalnih navad ali prehranskih dodatkov lipidov.
Uporabila sem robustno in natančno analizno metodo ekstrakcije lipidov, separacije lipidnih razredov in izolacije fosfolipidov na silikagel trdni fazi (SPE-Si), ki sem jo izboljšala in optimizirala. Izolaciji rdečih krvnih celic je sledila metoda postopne ekstrakcije tekoče-tekoče, s katero sem povečala izkoristek izoliranih celokupnih lipidov, ki sem jih z ekstrakcijo na trdni fazi ločila na nepolarne lipide in polarne fosfolipide. Optimizacijo izolacije fosfolipidov na trdni fazi sem izvedla z vzporednim preskušanjem in uporabo tankoplastne kromatografije (TLC).
Umiljenju fosfolipidne frakcije je sledila esterifikacija v metanolni raztopini borovega trifluorida. Sestavo metilnih estrov maščobnih kislin (FAME) fosfolipidov rdečih krvnih celic sem določala s plinsko kromatografijo (GC) s plamensko ionizacijskim detektorjem (FID). V membranah rdečih krvnih celic sem določila tudi dva dimetil acetala (heksadekanal in oktadekanal dimetil acetal; 16:0 DMA in 18:0 DMA), ki sta merilo oksidacijske prizadetosti celičnih membranskih fosfolipidnih plazmalogenov, ki so pomembni lipidni antioksidanti.
S kemometrijskimi in statističnimi metodami sem karakterizirala vzorce glede na sestavo in vsebnost maščobnih kislin in dimetil acetalov.
Študija je potrdila, da obstajajo pri opisanih bolnikih razlike v sestavi maščobnih kislin, kar bi lahko uporabili za diagnostične presejalne teste, kjer bi maščobne kisline prevzele vlogo bioloških označevalcev bolezni.
Ključne besede: rdeče krvne celice, eritrociti, celične membrane, fosfolipidi, maščobne kisline, profili maščobnih kislin, plazmalogeni, plinska kromatografija, tankoplastna kromatografija, metoda glavnih osi, klasifikacija
Objavljeno v DKUM: 01.07.2011; Ogledov: 4119; Prenosov: 451
Celotno besedilo (3,00 MB) |
4. Določevanje polikloriranih bifenilov v odpadnih oljih s plinsko kromatografijoIrena Rajh, 2010, diplomsko delo Opis: Danes se za določanje polikloriranih bifenilov v vzorcih olj uporabljata evropski standardni metodi
(EN 12766 in EN 61619). Za določitev vsebnosti polikloriranih bifenilov (PCB) v
transformatorskih oljih, motornih rabljenih oljih, nerabljenih oljih in certificiranih referenčnih
materialih (BCR-449 in BCR-420) smo uporabili plinsko kromatografijo z detektorjem na zajetje
elektronov (GC-ECD). Postopek priprave vzorca je bila ekstrakcija iz olj s heksanom.
Nepolarne matrične spojine se eluirajo iz adsorbenta skupaj s PCB-ji, nato jih injiciramo v
analitski sistem. Njihova prisotnost pa onesnažuje injekcijski prostor detektorja in kolone in s tem
se zmanjša občutljivost. Zaradi nezadostnega čiščenja pride do zakasnitve elucije PCB-jev iz
kolone. Z uporabo sulfoksidne kolone se PCB-ji bolje ločijo od alifatskih ogljikovodikov.
Uporabili smo plinski kromatograf Agilent Technologies (AT 6890N) z dvema kapilarnima
kolonama različne polarnosti HP-5MS in DB-1701 v povezavi z ECD detektorjem. Rezultate
vsebnosti polikloriranih bifernilov smo statistično ovrednotili glede na zahteve validacijskega
postopka (linearnost, meja določanja LOQ, pravilnost, izkoristek metode, ponovljivost in
obnovljivost). Iz rezultatov smo ugotovili, da so izkoristki pri certificiranih referenčnih materialih
znotraj predpisanega kriterija. Izkoristki za transformatorska olja so nekoliko manjši vendar še
vedno znotraj predpisanega kriterija. Z uporabo certificiranih referenčnih materialov smo dokazali,
da je analizna metoda pravilna.
Ključne besede: Poliklorirani bifenili, odpadna olja, plinska kromatografija, validacija, sulfoksidna
kolona
Objavljeno v DKUM: 20.07.2010; Ogledov: 3261; Prenosov: 324
Celotno besedilo (1,67 MB) |
5. Določanje posameznih in celokupnih fitosterolov v rastlinskih oljih s plinsko kromatografijo : diplomsko deloMarjetka Rodošek, 2009, diplomsko delo Ključne besede: kemija, rastlinska olja, kromatografija, fitosteroli, določanje, validacija, laboratoriji, diplomska dela
Objavljeno v DKUM: 31.05.2009; Ogledov: 3081; Prenosov: 222
Celotno besedilo (1,15 MB) |
