Search the digital library catalog

Abstract: Diplomsko delo prikazuje študijo encimske aktivnosti v ameriških borovnicah. Za študijo encimske aktivnosti smo izbrali ameriške borovnice, saj povpraševanje po le-teh v zadnjih letih znatno narašča. Predvidevamo, da ravno zaradi njihovih številnih pozitivnih učinkov na zdravje ljudi. V različnih vzorcih, pridobljenih iz ameriških borovnic, smo določili aktivnost desetim izbranim encimom, za katere smo sklepali, da se nahajajo v ameriških borovnicah. Poleg določevanja encimske aktivnosti smo vzorcem določili še koncentracijo proteinov z Bradfordovo metodo. Izvedli smo študijo encimske aktivnosti v ekstraktih tropin in borovničevem soku. Iz ameriških borovnic smo si najprej pipravili naslednje vzorce: • etanolni ekstrakt svežih tropin, • etanolni ekstrakt dehidriranih tropin, • sveži borovničev sok in • dehidrirani borovničev sok. Zgoraj naštetim vzorcem smo nato encimsko aktivnost določevali s pomočjo UV VIS spektrofotometra. V vzorcih smo določevali aktivnosti naslednjih encimov: -amilaze, glukoamilaze, celulaze, lipaze, lakaze, katalaze, peroksidaze, proteaze, transglutaminaze in superoksid dismutaze. Iz dobljenih rezultatov je razvidno, da najvišjo aktivnost v ameriških borovnicah izkazuje encim lipaza, vendar samo v svežem borovničevem soku in etanolnem ekstraktu dehidriranih tropin, v ostalih dveh vzorcih aktivnost lipaze ni bilo zaznati. Visoko encimsko aktivnost izkazuje tudi encim glukoamilaza v etanolnem ekstraktu svežih tropin. Prisotnost glukoamilaze smo potrdili v vseh vzorcih, prav tako tudi prisotnost encimov celulaze, α amilaze, peroksidaze, lakaze, transglutaminaze in proteaze. Ugotovili smo tudi, da se encima katalaza in superoksid dismutaza ne nahajata v naših vzorcih oziroma je njihova aktivnost tako nizka, da jo z uporabljenimi aktivnostnimi testi ni bilo mogoče zaznati. S pomočjo Bradfordove metode smo določili, da je koncentracija proteinov najvišja v etanolnem ekstraktu dehidriranih tropin, sledi ji etanolni ekstrakt svežih tropin, dehidriran borovničev sok, najnižjo koncentracijo proteinov pa smo določili v svežem borovničevem soku.
Keywords: ameriške borovnice, encimska aktivnost, koncentracija proteinov, Soxhletova ekstrakcija
Published in DKUM: 16.09.2022; Views: 622; Downloads: 57
Full text (6,13 MB)

Abstract: Namen diplomskega dela je obsegal pripravo imobilizirane hrenove peroksidaze (HRP), in sicer inkapsulirane v obliki alginatnih kroglic, določanje preostale aktivnosti inkapsulirane HRP ter določanje aktivnosti inkapsulirane HRP po skladiščenju pri temperaturah -18 °C, 4 °C, 22 °C in 30 °C. Encim HRP smo inkapsulirali v natrijev alginatni hidrogel z metodo ionotropnega geliranja v raztopini kalcijevega klorida (CaCl2) v obliki sferičnih kroglic. Vzorce kroglic z inkapsulirano HRP smo razdelili na 2 dela ter jih skladiščili v natrijevem acetatnem pufru (pH = 7,8) in na suhem v petrijevki. Rezultate smo primerjali s preostalo aktivnostjo HRP v raztopini in ovrednotili vpliv in način skladiščenja na aktivnost inkapsulirane HRP z izbranim nosilcem. Ugotovili smo nezanemarljiv vpliv alginatnega nosilca na preostalo aktivnost HRP. Rezultati kažejo, da alginatni nosilec učinkovito izboljša aktivnost HRP, medtem ko podaljšanja uporabnosti nismo potrdili. Inkapsulirani HRP v pufru se preostala aktivnost pri temperaturah skladiščenja -18 °C in 4 °C s časom povečuje in je v začetku nižja od preostale aktivnosti HRP, skladiščene pri višji temperaturi. Kot najbolj primeren način se izkaže skladiščenje inkapsulirane HRP v pufru, četudi smo potrdili njeno uhajanje iz alginatnih kroglic.
Keywords: imobilizacija, hrenova peroksidaza, inkapsulacija, natrijev alginat, encimska aktivnost
Published in DKUM: 09.11.2020; Views: 1275; Downloads: 114
Full text (2,55 MB)

Abstract: Diplomsko delo opisuje sintezo zamreženih encimskih skupkov iz encima lakaze (CLEAs). Sinteza CLEAs delcev iz lakaze je potekala po določenem postopku, pri katerem sta najpomembnejši fazi obarjanje in zamreženje. Raztopino encima lakaze smo obarjali v različnih obarjalnih reagentih, najuspešnejša sta bila obarjalna reagenta etanol, 1-propanol in 2-propanol. Oborjeni encim smo zamreževali z mrežnim povezovalcem glutaraldehidom. Zamreženim encimskim skupkom smo določevali učinkovitost imobilizacije in preostalo aktivnost imobiliziranega encima v primerjavi s prostim encimom. Pri postopku imobilizacije smo z namenom, da bi dosegli čim višjo učinkovitost imobilizacije ter čim višjo preostalo aktivnost imobiliziranega encima, spreminjali parametre, kot so volumski deleži glutaraldehida, čas zamreženja, vpliv ogrodnih proteinov govejega seruma albumina (BSA) in jajčnega albumina (EA), volumski deleži natrijevega cianoborohidrida in temperaturo zamreženja. Vse vzorce smo tudi dvakrat spirali, z namenom da bi odstranili nezamrežen encim.
Keywords: Lakaza, imobilizacija, zamreženi encimski skupki, obarjanje, zamreženje, glutaraldehid, encimska aktivnost
Published in DKUM: 22.11.2017; Views: 1862; Downloads: 164
Full text (1,71 MB)