1. Synergistic effect of supercritical and ultrasound-assisted ginger (Zingiber officinale Roscoe) extractsTaja Žitek Makoter, Nika Kučuk, Vesna Postružnik, Maja Leitgeb, Željko Knez, Mateja Primožič, Maša Knez Marevci, 2022, original scientific article Abstract: Proper processing of natural material is crucial to obtain an extract with high content of
biologically active components. Dried, grinded ginger roots were extracted by ultrasonic method
and supercritical extraction with CO2
. The aim of the study was to determine if a mixture of the two
types of extracts attained by different methods and solvents exhibits better bioavailability than each
extract itself. Therefore, both extracts were analytically evaluated and then mixed in a ratio of 1:1.
The supercritical extract (SCG extract) and the mixed extract (mixG extract) had high antioxidant
activity (78% and 73%) and total phenols (827 mg/g ext. and 1455 mg/g ext.), which is also consistent
with the levels of gingerol (303 mg/g ext. and 271 g/g ext.) and shogaol (111 mg/g ext. and 100 g/g
ext.) in the extracts. In comparison to both pure extracts higher levels of total phenols were found
in the extract mixG. This could be the reason for the significant inhibition of melanoma cells and
antimicrobial potential (against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Candida albicans). The
combination of the extracts resulted in a significant increase in the inhibition of selected microbial
and melanoma cells WM-266-4 compared to the control. Cell viability decreased below 60% when
mixG extract was applied. Antimicrobial activity has been confirmed. Keywords: ginger, supercritical fluid extraction, ultrasound-assisted extraction, antimicrobial activity Published in DKUM: 09.05.2025; Views: 0; Downloads: 0
Full text (1,59 MB) This document has many files! More... |
2. Supercritical fluid and conventional extractions of high value-added compounds from pomegranate peels waste: production, quantification and antimicrobial activity of bioactive constituentsKaja Kupnik, Maja Leitgeb, Mateja Primožič, Vesna Postružnik, Petra Kotnik, Nika Kučuk, Željko Knez, Maša Knez Marevci, 2022, original scientific article Abstract: This study is focused on different extractions (Cold Maceration (CM), Ultrasonic Extraction
(UE), Soxhlet Extraction (SE) and Supercritical Fluid Extraction (SFE)) of bioactive compounds from
pomegranate (Punica Granatum L.) fruit peels using methanol, ethanol, and acetone as solvents in
conventional extractions and changing operating pressure (10, 15, 20, 25 MPa) in SFE, respectively.
The extraction yields, total phenols (TP) and proanthocyanidins (PAC) contents, and antioxidant
activity of different extracts are revealed. TP and PAC recovered by extracts ranged from 24.22 to
42.92 mg gallic acid equivalents (GAE)/g and 2.01 to 5.82 mg PAC/g, respectively. The antioxidant
activity of extracts ranged from 84.70% to 94.35%. The phenolic compound identification and
quantification in selective extracts was done using the LC-MS/MS method. The contents of different
flavonoids and phenolic acids have been determined. SFE extract, obtained at 20 MPa, contained
the highest content (11,561.84 µg/g) of analyzed total polyphenols, with predominant ellagic acid
(7492.53 µg/g). For the first time, Microbial Growth Inhibition Rates (MGIRs) were determined at
five different concentrations of pomegranate SFE extract against seven microorganisms. Minimal
Inhibitory Concentration (MIC90) was determined as 2.7 mg/mL of SFE pomegranate peel extract in
the case of five different Gram-negative and Gram-positive bacteria. Keywords: antimicrobial activity, antioxidants, bioactive compounds, extraction, LC-MS/MS, phenolics, phytochemistry, pomegranate, Punica Granatum L., secondary metabolites Published in DKUM: 24.03.2025; Views: 0; Downloads: 3
Full text (2,02 MB) This document has many files! More... |
3. Napredni biološko aktivni transportni sistemi ekstraktov manga (Mangifera indica) za terapevtske aplikacije in vitro : doctoral dissertationNika Kučuk, 2024, doctoral dissertation Abstract: Doktorska disertacija je razdeljena na štiri dele, v katerih sta obravnavana študija biološke aktivnosti ekstraktov olupkov manga (MPE) ter optimiranje sinteznih metod transportnih sistemov (alginatne kroglice, liposomi in micelarne membrane mikrobnega izvora), vključno z njihovo funkcionalizacijo z MPE za različne terapevtske aplikacije (in vitro).
V prvem delu smo s pomočjo različnih ekstrakcijskih metod iz svežih in suhih olupkov manga pridobili MPE z visoko vsebnostjo totalnih fenolov, proantocianidinov, posameznih fenolnih spojin, proteinov in nekaterih encimov v aktivnih oblikah ter z visoko antioksidativno aktivnostjo. Nadalje smo potrdili protibakterijske lastnosti testiranih MPE na rast Gram-negativnih (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa) ter Gram-pozitivnih bakterij (Bacillus cereus, Staphylococcus aureus). Z uporabo nizkocenovnega postopka sušenja olupkov manga na zraku smo ohranili biološko aktivnost MPE. Na vsebnost bioaktivnih spojin in biološko aktivnost pa sta vplivala tudi uporabljena ekstrakcijska metoda in topilo. Ultrazvočni etanolni MPE iz suhih olupkov je zagotovil dobro protibakterijsko in antioksidativno delovanje, zato smo ga v nadaljevanju vgradili v različne transportne sisteme.
V drugem delu smo MPE enkapsulirali v alginatne kroglice, proizvedene z metodo ionotropske gelacije. Sintetizirani napredni biološko aktivni sistem izkazuje dobro termično stabilnost s temperaturo degradacije nad 270 °C. Prav tako ni bilo prisotnih razpok na površini sintetiziranih liofiliziranih alginatnih kroglic. Alginatne kroglice so se izkazale kot odličen transportni sistem za enkapsuliran MPE zaradi stabilnosti pri kislih želodčnih pogojih in posledično doseganje tarčnega mesta (črevesje), kjer smo dosegli postopno sproščanje MPE, kar pomembno vpliva na uspešno absorpcijo v telesu. S protibakterijsko študijo smo dokazali pomemben inhibitorni učinek alginatnih kroglic z MPE na rast patogenih črevesnih bakterij E. coli in S. aureus.
V tretjem delu smo optimirali sintezo liposomov za uspešno enkapsulacijo MPE. Za formulacijo liposomov smo uporabili metodo hidracije tankega lipidnega filma z dodatkom 5 mm steklenih kroglic in 24-h stresanjem. Zelo stabilno in monodisperzno formulacijo liposomov z velikostjo delcev <300 nm smo dosegli z uporabo polarnega organskega topila etanola, z uporabo nepolarnih topil pa so najboljšo stabilnost izkazovali liposomi, proizvedeni s kloroformom. Uspešno smo enkapsulirali MPE v liposome in potrdili profil enakomernega sproščanja MPE, vključno z inhibitorno aktivnostjo na rast E. coli in S. aureus. Sintetizirani liposomi z enkapsuliranim MPE se med postopkom liofilizacije niso degradirali, prav tako so bili termično stabilni in ni bilo zaznati signifikantnih kemijskih interakcij med enkapsulirano bioaktivno spojino ter lipidi fosfolipidnega dvosloja.
V četrtem delu smo optimirali gojenje terapevtskih gob Ganoderma lucidum in Pleurotus ostreatus s submerzno kultivacijo za doseganje najvišjega prirasta in posledično najintenzivnejše tvorbe micelarnih membran s sposobnostjo visoke absorpcije vode. Sestava in pH rastnega medija sta imela ključen vpliv na tvorbo membran ter njihove karakteristike. Najustreznejši rastni pogoji so bili zagotovljeni pri bazičnem pH v mediju, ki je vseboval sladni ekstrakt za G. lucidum, in v mediju z dodatkom glukoze za P. ostreatus. Zaradi hidrofilne spodnje površine micelarnih membran so te izkazovale visoko sposobnost absorpcije vode, in sicer več kot 600 % za P. ostreatus in do 500 % za G. lucidum. Potrdili smo prisotnost širokega spektra funkcionalnih skupin, termično stabilnost s temperaturo degradacije nad 260 °C ter vlaknasto in porozno strukturo nastalih micelarnih membran. Micelarne membrane obeh gob smo nadalje uspešno funkcionalizirali z MPE ter dosegli enakomeren in postopen profil sproščanja MPE, vključno z uspešnim protibakterijskim delovanjem funkcionaliziranih membran na rast E. coli in S. aureus. Keywords: mango, ekstrakcija, polifenolne spojine, protibakterijska aktivnost, transportni sistemi, alginatne kroglice, liposomi, micelarne membrane, funkcionalizacija, enkapsulacija, vgrajevanje, in vitro sproščanje, karakterizacija Published in DKUM: 02.10.2024; Views: 0; Downloads: 54
Full text (13,98 MB) |
4. Sodobne transportne oblike za formulacijo aktivnih substanc v kozmetični industriji : magistrsko deloAnja Košak, 2024, master's thesis Abstract: Liposomi, sferični mehurčki s fosfolipidno membrano in omogočajo enkapsulacijo različnih snovi z nadzorovanim sproščanjem. Zato so obetavni za različne aplikacije, vključno s kozmetično industrijo. Polisaharidi, naravni polimeri monosaharidov, so cenjeni v kozmetiki zaradi svojih vlažilnih in teksturnih lastnosti. Polisaharidna prevleka na liposomih lahko poveča njihovo stabilnost, zagotovi ciljno dostavo in nadzorovano sproščanje enkapsuliranih učinkovin.
V magistrski nalogi smo sintetizirali liposome s polisaharidnimi prevlekami in vgrajenim ekstraktom mangovih olupkov (MNG). Uporabili smo polisaharide alginat, biosaharid gumi-1 in tara gumi ter proučevali vpliv koncentracije posameznega polisaharida in čas tvorbe prevleke na karakteristike pridobljene liposomske formulacije. Določevali smo zeta potencial, velikost delcev, polidisperzni indeks (PDI), učinkovitost enkapsulacije MNG in kinetiko sproščanja MNG iz liposomov.
Rezultati so pokazali, da se povprečna velikost delcev povečuje tako z naraščajočim časom tvorbe polisaharidne prevleke, kot tudi z naraščajočo koncentracijo testiranega polisaharida. Zeta potencial vseh liposomskih formulacij brez ali s polisaharidnimi prevlekami je bil izven območja –30 mV in +30 mV, kar potrjuje, da so bile vse pripravljene formulacije stabilne. Višje koncentracije polisaharidov so povzročile manjšo monodisperznost zaradi debelejše prevleke. Pri višjih koncentracijah polisaharidov so bili povprečni premeri delcev višji zaradi tvorbe debelejše prevleke, prav tako so bile vrednosti PDI višje, kar nakazuje na manj enakomerno velikostno porazdelitev.
Izmed testiranih polisaharidnih prevlek za stabilizacijo liposomov smo najboljše karakteristike za potencialno uporabo v kozmetični industriji dosegli z alginatno prevleko, in sicer s koncentracijo 8 mg/mL. Pri tem smo potrdili stabilno formulacijo funkcionaliziranih liposomov z enakomerno velikostno porazdelitvijo delcev s povprečnim premerom 2483,76 nm. Učinkovitost enkapsulacije MNG v liposome prevlečene z alginatno prevleko je znašala 59,45 % Liposomi z alginatno prevleko so izkazovali najboljši profil sproščanja MNG, pri čemer se je iz njih po 24 h sprostilo 97,47 % MNG. Prav tako je losjon z liposomi z vgrajenim MNG z alginatno prevleko izkazal najboljše inhibitorne lastnosti proti testiranim bakterijam Escherichia coli in Staphylococcus aureus ter najnižje vrednosti peroksidnega števila, kar nakazuje na uspešni zaviralni učinek oksidacije maščob v pripravljenem losjonu. Tako liposomi z vgrajenim MNG in alginatno prevleko predstavljajo sodobno transportno obliko za kozmetične aplikacije. Keywords: mangov ekstrakt, liposomi, enkapsulacija, sproščanje, inhibitorne lastnosti Published in DKUM: 01.10.2024; Views: 0; Downloads: 18
Full text (3,11 MB) |
5. Micelarne strukture za stabilizacijo terapevtskih encimov : diplomsko delo visokošolskega strokovnega študijskega programa I. stopnjeAnja Zirdum, 2024, undergraduate thesis Abstract: Encimi so biološke molekule, sestavljene iz enega ali več polipeptidnih verig, ki se zvijejo v specifične tridimenzionalne oblike. Njihova specifična tridimenzionalna struktura omogoča vezavo substratov na aktivna mesta, kjer se izvajajo katalitične reakcije. Specifičnost encimov izhaja iz natančnega prileganja med encimom in substratom, kar pogosto opisujemo s pojmom "ključ-ključavnica". Vsak encim je tako usmerjen k določenemu substratu ali vrsti reakcije, kar omogoča visoko stopnjo regulacije in učinkovitosti v bioloških sistemih. Veliko prednost predstavlja imobilizacija encimov na trdne nosilce, kar omogoča njihovo ponovno uporabo in izboljša stabilnost ter učinkovitost encima. Uporaba imobiliziranih encimov je zaradi lažjega ločevanja od reakcijskih zmesi in posledično nižjih stroškov procesa vse bolj zaželena v industrijskih in biotehnoloških panogah. Encim transglutaminaza (TGM) se uporablja v različnih panogah, veliko vlogo ima predvsem v medicini in živilski panogi, kjer ga pogosto uporabljajo za izboljšanje teksture mesa, mlečnih izdelkov in drugih prehrambenih izdelkov.
Diplomsko delo najprej zajema proizvodnjo micelarnih struktur z gojenjem medicinske gobe Ganoderma lucidum v tekočem hranilnem mediju s sladnim in kvasnim ekstraktom pri 28 °C pri statičnih pogojih. Za tvorbo micelarnih struktur je bilo potrebno gojiti G. lucidum 14 dni. Povprečna debelina micelarnih struktur je bila 0,493 mm, povprečna masa pa 3,961 g. Proizvedene micelarne strukture so izkazale visoko sposobnost absorbiranja vode z doseženim odstotkom nabrekanja po 24 h 579,3 %. S FTIR analizo smo potrdili prisotnost proteinov, lipidov in polisaharidov, s SEM analizo pa prisotnost por in hif v micelarnih strukturah. Povprečni premer por je znašal 40 µm, povprečni premer hif pa 425 nm.
V nadaljevanju študije smo izvedli stabilizacijo terapevtskega encima TGM z imobilizacijo na sintetizirane micelarne strukture z metodo adsorpcije in določili učinkovitost in zmogljivost ujetja encima. Najvišja učinkovitost imobilizacije TGM v micelarne strukture je znašala 41,98 % , kar ustreza masi vgrajenega encima 8,97 g. S študijo sproščanja smo ugotovili, da se je encim uspešno adosrbiral, saj se encim niti po 24 h ni sprostil iz micelarnih struktur. Najverjetneje je adsorbirana TGM v micelarne strukture katalizirala tvorbo kavalentnih vezi med proteini in je prišlo do zamreženja TGM v notranjosti micelarnih struktur, ki vsebuje tudi proteine. Zato smo proučili potek encimske reakcije z imobiliziranim encimom v micelarne strukture pri različnih koncentracijah substrata in kinetiko imobiliziranega encima primerjali s kinetiko prostega encima. Določili smo kinetična parametra, kot sta Michaelis-Mentenova konstanta (KM) in maksimalna reakcijska hitrost (vmax) za prostiin imobilizirani encim z Lineweaver-Burkovim diagramom. Pri tem smo ugotovili, da ima sicer imobiliziran encim slabšo afiniteto do substrata kot prosti encim, zaradi višje izračunane vrednosti KM in nižje vmax.
Sledilo je proučevanje vpliva mase ujetega encima na potek encimske reakcije v odvisnosti od časa. Ugotovili smo, da z naraščanjem mase imobiliziranega encima, reakcija, torej pretvorba substrata v produkt, poteka hitreje. Pri najvišji možni ujeti masi encima (8,97 mg ) v micelarne strukture smo dosegli plato, saj ni bilo zaznati signifikantnih razlik med profilom poteka encimske reakcije med 8,97 mg (13 mg/mL) in 8,76 mg ujetega encima (10 mg/mL).
Imobilizacija encima na trdni nosilec je primerna za številne aplikacije. Z uspešno imobilizacijo encima TGM v micelarne strukture medicinske gobe G. lucidum, smo pripravilli stabilen funkcionalizirani naravni biokompozit, ki se lahko uporabi za različne biomedicinske aplikacije, predvsem za celjenje ran. Keywords: Ganoderma lucidum, micelarne strukture, encimi, transglutaminaza, imobilizacija, encimski test Published in DKUM: 26.09.2024; Views: 0; Downloads: 15
Full text (4,26 MB) |
6. Mango peels as an industrial by-product: a sustainable source of compounds with antioxidant, enzymatic, and antimicrobial activityNika Kučuk, Mateja Primožič, Petra Kotnik, Željko Knez, Maja Leitgeb, 2024, original scientific article Abstract: Plant waste materials are important sources of bioactive compounds with remarkable health-promoting benefits. In particular, industrial by-products such as mango peels are sustainable sources of bioactive substances, with antioxidant, enzymatic, and antimicrobial activity. Appropriate processing is essential to obtain highly bioactive compounds for further use in generating value-added products for the food industry. The objective of the study was to investigate and compare the biological activity of compounds from fresh and dried mango peels obtained by different conventional methods and unconventional extraction methods using supercritical fluids (SFE). The highest total phenolic content (25.0 mg GAE/g DW) and the total content of eight phenolic compounds (829.92 µg/g DW) determined by LC-MS/MS were detected in dried mango peel extract obtained by the Soxhlet process (SE). SFE gave the highest content of proanthocyanidins (0.4 mg PAC/g DW). The ethanolic ultrasonic process (UAE) provided the highest antioxidant activity of the product (82.4%) using DPPH radical scavenging activity and total protein content (2.95 mg protein/g DW). Overall, the dried mango peels were richer in bioactive compounds (caffeic acid, chlorogenic acid, gallic acid, catechin, and hesperidin/neohesperidin), indicating successful preservation during air drying. Furthermore, outstanding polyphenol oxidase, superoxide dismutase (SOD), and lipase activities were detected in mango peel extracts. This is the first study in which remarkable antibacterial activities against the growth of Gram-negative bacteria (Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa) and Gram-positive bacteria (Bacillus cereus and Staphylococcus aureus) were evaluated by determining the microbial growth inhibition rate after 12 and 24 h incubation periods for mango peel extracts obtained by different methods. Ethanolic SE and UAE extracts from dried mango peels resulted in the lowest minimum inhibitory concentrations (MIC90) for all bacterial species tested. Mango peels are remarkable waste products that could contribute to the sustainable development of exceptional products with high-added value for various applications, especially as dietary supplements. Keywords: mangifera indica, peels, bioactive substances, LC-MS/MS, proteins, enzymes, antibacterial activity Published in DKUM: 12.08.2024; Views: 104; Downloads: 11
Full text (6,49 MB) |
7. Alginate beads with encapsulated bioactive substances from mangifera indica peels as promising peroral delivery systemsNika Kučuk, Mateja Primožič, Željko Knez, Maja Leitgeb, 2024, original scientific article Abstract: Since various bioactive substances are unstable and can degrade in the gastrointestinal tract, their stabilization is crucial. This study aimed to encapsulate mango peel extract (MPE) into edible alginate beads using the ionotropic gelation method for the potential oral delivery of bioactive substances. Mango peels, generally discarded and environmentally harmful, are rich in health-promoting bioactive substances. The alginate beads were examined for entrapment efficiency, particle size, morphology, thermal stability, physiochemical interactions, release profile under gastrointestinal conditions, and antibacterial efficacy. The study demonstrated the successful encapsulation of MPE with an efficiency of 63.1%. The in vitro release study showed the stability of the alginate beads in simulated gastric fluid with a maximum release of 45.0%, and sustained, almost complete release (99.4%) in simulated intestinal fluid, indicating successful absorption into the human body. In both fluids, the MPE release followed first-order kinetics. Encapsulation successfully maintained the antibacterial properties of MPE, with significant inhibitory activity against pathogenic intestinal bacteria. This is the first study on MPE encapsulation in alginate beads, presenting a promising oral delivery system for high-added-value applications in the food industry for dietary supplements, functional foods, or food additives. Their production is sustainable and economical, utilizing waste material and reducing environmental pollution. Keywords: alginate beads, encapsulation, Mangifera indica, mango peels, characterization, in vitro release, antbacterial activity Published in DKUM: 02.08.2024; Views: 104; Downloads: 21
Full text (6,98 MB) |
8. Protimikrobna aktivnost funkcionaliziranih micelarnih struktur za terapevtske namene : magistrsko deloAnja Mešl, 2024, master's thesis Abstract: Glive predstavljajo dragocen vir prehranskih dopolnil, aminokislin, beljakovin, vitaminov, mineralov, ogljikovih hidratov in maščob. Proizvajajo številne bioaktivne spojine, ki jih lahko uporabljamo v industriji, biotehnologiji, farmaciji in medicini. Terapevtski gobi Ganoderma lucidum in Pleurotus ostreatus se že vrsto let uporabljata v zdravilne namene.
Cilj magistrske naloge je bil optimizirati pogoje rasti micelarnih struktur (MS), kot so pH, čas gojenja in vrsta hranilnega tekočega medija, saj ti pogoji bistveno vplivajo na rast micelija in izoblikovanje MS. Najvišjo prirast MS G. lucidum smo dosegli v hranilnem mediju z dodatkom sladnega ekstrakta, medtem ko za P. ostreatus v mediju z dodatkom glukoze. Ugotovili smo, da je bila pri obeh glivah zagotovljena najboljša rast pri pH 8,5. Nadalje smo z optimiranjem časa ugotovili, da sta za nastanek MS G. lucidum potrebna 2 tedna, medtem ko za P. ostreatus 3 tedni.
MS predstavljajo naravne, trajnostne in biorazgradljive materiale, ki se lahko uporabljajo tudi za terapevtske namene, kot je izdelava obližev za celjenje ran, saj se v njihovo strukturo učinkovito ujamejo različne učinkovine s protimikrobnimi lastnostmi. Proučevali smo morfologijo, kemijsko sestavo in hidrodinamične lastnosti pridobljenih MS. MS smo tudi funkcionalizirali z ultrazvočnim ekstraktom iz olupkov manga oz. antibiotikom ciprofloksacinom kot referenčno učinkovino. Primerjali smo njihove karakteristike z referenčnimi strukturami (MS brez funkcionalizacije z učinkovinami) ter določili učinkovitost ujetja, in vitro sproščanje ter protimikrobne lastnosti funkcionaliziranih MS. Rezultati kažejo na učinkovito ujetje učinkovin v MS obeh terapevtskih gob in postopno sproščanje učinkovin iz MS. Prav tako so MS z ekstraktom oz. antibiotikom uspešno zavirale rast Gram-negativnih (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa) in Gram-pozitivnih bakterij (Bacillus cereus, Staphylococcus aureus). Keywords: micelarne strukture, Ganoderma lucidum, Pleurotus ostreatus, karakterizacija, funkcionalizacija, protimikrobnost Published in DKUM: 16.07.2024; Views: 165; Downloads: 40
Full text (4,85 MB) |
9. |
10. Sustainable Biodegradable Biopolymer-Based Nanoparticles for Healthcare ApplicationsNika Kučuk, Mateja Primožič, Željko Knez, Maja Leitgeb, 2023, review article Abstract: Biopolymeric nanoparticles are gaining importance as nanocarriers for various biomedical applications, enabling long-term and controlled release at the target site. Since they are promising delivery systems for various therapeutic agents and offer advantageous properties such as biodegradability, biocompatibility, non-toxicity, and stability compared to various toxic metal nanoparticles, we decided to provide an overview on this topic. Therefore, the review focuses on the use of biopolymeric nanoparticles of animal, plant, algal, fungal, and bacterial origin as a sustainable material for potential use as drug delivery systems. A particular focus is on the encapsulation of many different therapeutic agents categorized as bioactive compounds, drugs, antibiotics, and other antimicrobial agents, extracts, and essential oils into protein- and polysaccharide-based nanocarriers. These show promising benefits for human health, especially for successful antimicrobial and anticancer activity. The review article, divided into protein-based and polysaccharide-based biopolymeric nanoparticles and further according to the origin of the biopolymer, enables the reader to select the appropriate biopolymeric nanoparticles more easily for the incorporation of the desired component. The latest research results from the last five years in the field of the successful production of biopolymeric nanoparticles loaded with various therapeutic agents for healthcare applications are included in this review. Keywords: nanoparticles, biopolymers, therapeutic substances, incorporation, biocompatibility, healthcare, biomedical applications Published in DKUM: 02.04.2024; Views: 231; Downloads: 14
Full text (3,50 MB) This document has many files! More... |